1.重要的洗刷：.

ELISA試劑盒如果洗刷不充分，會形成一系列的差異和高布景冬導致試驗成果偏差大。如果未結合的材料殘留在微孔板中，那么它會添加布景噪音。條件答應的情況下，恰當添加洗刷液中的鹽濃度，這會阻撓非特異結合反響。如果布景過高,置疑洗刷不行時，能夠測驗添加洗刷次數。

2.關鍵的關閉：

關閉液的作用是讓不相關的蛋白占據微孔板中潛在的結合位點。ELISA試劑盒這就降低了可產生信號的抗體非特異結合的時機。如果布景過高，置疑關閉不充分，那么能夠測驗運用更高濃度的關閉液，或恰當延長關閉時刻現在主要有兩種類型的關閉液:蛋白和非離子型去污劑。運用的類型須取決于多個要素，包含微孔板的外表試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的關閉液應降低非特異性結合,但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發生相互作用。

3.抗體濃度須優化：

如果試劑稍有不同，ELISA試劑盒則可能需求優化抗體的量。非特異的抗體結合會添加布景。為了防止這一點， 切勿運用過多的-抗或二抗。

4.、檢測試劑要適量:

必定不能夠運用過多的檢測試劑。如果濃度過高,或許未正確稀釋,則會導致高布景。也不要顯色過度，如有必要，優化-下何時應加入停止液。

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